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支原體DNA抽提Kit被污染后有哪些表現(xiàn)

更新時(shí)間:2022-10-26  |  點(diǎn)擊率:1177
支原體DNA抽提Kit特點(diǎn)及操作步驟  
特點(diǎn)  
1.符合歐洲藥典的要求。  
2.從細(xì)胞上清和生物制品中,均可分離支原體DNA,全程只需30分鐘。  
3.洗脫DNA純度高,體積50μl,保證PCR最大的靈敏。  
細(xì)胞被支原體污染后的表現(xiàn)  
①細(xì)胞生長緩慢  
②細(xì)胞變形  
③培養(yǎng)基中碎片增加  
④細(xì)胞易聚團(tuán)  
⑤鏡下觀察有小黑點(diǎn)  
⑥培養(yǎng)基提前變色  
操作步驟  
試劑盒組分  
Spin columns(核酸純化住)、Collection tubes(收集管)、Conditioner液、Binding Buffer E液、Buffer A1液、Buffer A2液、Buffer E液
該試劑盒的設(shè)計(jì)滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本(如軟骨細(xì)胞、血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清)在DNA抽提后的檢測標(biāo)準(zhǔn)。可直接檢測細(xì)胞上清(研究領(lǐng)域),或者先對細(xì)胞培養(yǎng)物富集,或先抽提DNA。該試劑盒完全符合EP2.6.7和JP G3的要求。
檢測原理:
該試劑盒擴(kuò)增柔膜體對應(yīng)的16S rRNA上的特異序列, 而真核細(xì)胞和其他細(xì)菌DNA不會被擴(kuò)增。
試劑盒說明書同時(shí)包括細(xì)胞培養(yǎng)上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程,包括對DNA抽提和對樣本體積的規(guī)定。整個(gè)檢測小于3小時(shí)。并且與ELISA、熒光染色和培養(yǎng)法不同的是,無須活支原體。和一些生化和細(xì)胞學(xué)方法相比,PCR具有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。
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